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物理化學(xué)特性
光譜特征：在pH 7.0水溶液中，最大吸收波長約331 nm（ε ≈ 21,000 M?1cm?1），該吸收源于n-π*躍遷，常用于濃度定量。
反應(yīng)性：巰基/硫酮基具有親核性，易與烷基化試劑（如碘乙酰胺）或馬來酰亞胺發(fā)生加成反應(yīng)，也可在UV 365 nm照射下與鄰近堿基交聯(lián)。
穩(wěn)定性：對(duì)酸敏感，強(qiáng)酸中糖苷鍵易水解；硫原子易被氧化為亞砜，需避光冷藏保存。
功能應(yīng)用
tRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定劑：在細(xì)菌tRNA中作為保守修飾，通過增強(qiáng)堿基堆積力穩(wěn)定L形三級(jí)結(jié)構(gòu)，提高翻譯準(zhǔn)確性。
RNA光交聯(lián)探針：將s?U摻入RNA后，紫外照射可使其與結(jié)合蛋白質(zhì)形成共價(jià)交聯(lián)，用于繪制RNA-蛋白質(zhì)相互作用圖譜（如PAR-CLIP技術(shù)）。
代謝標(biāo)記工具：在細(xì)胞培養(yǎng)中利用4-硫代尿苷（s?U）脈沖標(biāo)記新生RNA，通過生物素-馬來酰亞胺偶聯(lián)純化，分析轉(zhuǎn)錄組動(dòng)態(tài)（如SLAM-seq）。
實(shí)驗(yàn)反應(yīng)示例