生物素-4-巰基尿苷是一種兼具特異性識別與化學(xué)活性的修飾核苷，英文名為Biotin-4-mercaptouridine，其核心結(jié)構(gòu)由尿苷骨架、巰基（-SH）和生物素基團(tuán)三部分構(gòu)成，獨(dú)特的分子設(shè)計使其在分子生物學(xué)與生物化學(xué)研究中占據(jù)特殊地位。
從化學(xué)屬性來看，該物質(zhì)分子式可表示為C??H??N?O?S?，分子量約430.5。作為核苷衍生物，它保留了尿苷與核酸結(jié)合的特性，同時巰基的引入賦予其巰基反應(yīng)活性，生物素基團(tuán)則提供了與親和素（Avidin）或鏈霉親和素（Streptavidin）的特異性結(jié)合能力——這一結(jié)合作用的解離常數(shù)低至10?1?mol/L，是生物體系中最強(qiáng)的非共價相互作用之一。
物理化學(xué)特性上，生物素-4-巰基尿苷易溶于水及二甲亞砜等極性有機(jī)溶劑，在中性pH環(huán)境下性質(zhì)穩(wěn)定，而巰基在氧化條件下可形成二硫鍵，這一特性為其固定化提供了便利。其分子結(jié)構(gòu)中，尿苷部分可通過堿基配對嵌入核酸鏈，生物素基團(tuán)暴露于分子表面，形成“核酸標(biāo)記-親和捕獲”的功能通路。
功能應(yīng)用中，它最核心的作用是核酸標(biāo)記與檢測。在RNA合成反應(yīng)中加入該物質(zhì)，可使生物素標(biāo)簽伴隨RNA合成整合入鏈，后續(xù)通過鏈霉親和素修飾的磁珠或熒光探針，實現(xiàn)RNA的高效捕獲與可視化定量，廣泛用于基因表達(dá)分析。在蛋白質(zhì)-RNA相互作用研究中，其標(biāo)記的RNA可與結(jié)合蛋白共沉淀，助力調(diào)控蛋白的篩選鑒定。